Биохимическая и функциональная характеристика эндонуклеазы NucS из Mycobacterium tuberculosis
Просмотры: 16 / Загрузок PDF: 3
DOI:
https://doi.org/10.32523/2616-7034-2026-155-2-19-37Ключевые слова:
туберкулез, Mycobacterium tuberculosis, NucS, репарация ДНК, репарация ошибочно спаренных оснований, антибиотикорезистентностьАннотация
Нарастающая лекарственная устойчивость M. tuberculosis обусловливает необходимость поиска новых молекулярных мишеней. Перспективным объектом в этом отношении является эндонуклеаза NucS — функциональный аналог канонической системы репарации ошибочно спаренных оснований MutS–MutL–MutH, отсутствующих у микобактерий.
В настоящей работе проведена биохимическая и функциональная характеристика NucS из M. tuberculosis. Рекомбинантные белки MtbNucS и MtbDnaN получены в системе E. coli Arctic Express (DE3). Показано, что MtbNucS проявляет избирательную нуклеазную активность в отношении субстратов с мисматчами G•T и U•G; оптимальные условия катализа — 25 мМ Tris-HCl (pH 8,0), 40 мМ MgCl₂ и 2,5 мМ MnCl₂. Скользящий зажим MtbDnaN оказывает двухфазный дозозависимый эффект на активность фермента. Сайт-направленный мутагенез подтвердил ключевую роль остатков W52 и D137 в формировании активного центра NucS. Полученные данные обосновывают перспективность MtbNucS как мишени для разработки новых противотуберкулёзных препаратов.
